作者：施云威 北京积水潭医院

通过体细胞核移植（SCNT）产生的克隆动物的健康自诞生以来一直备受关注；然而，没有对晚发性非传染性疾病的详细评估。在这里，我们报告了在13只克隆羊的队列中，SCNT没有明显的有害长期健康影响。我们对13只年龄（7–9岁）的克隆羊进行了肌肉骨骼评估、代谢测试和血压测量，其中包括4只来源于多莉的细胞系。我们还对所有主要关节进行放射学检查，包括多利受骨关节炎影响最严重的关节——膝盖，并将所有健康参数与5岁和6岁的绵羊组进行比较，并公布参考范围。尽管年龄大了，但这些克隆是血糖正常、胰岛素敏感和血压正常的。重要的是，我们在一些动物身上观察到除了轻度或在一例中为中度的骨关节炎之外，没有任何退行性关节疾病的临床症状。我们的研究是首次评估大动物SCNT的长期健康结果。
2016年7月，庆祝了第一只由成年细胞衍生的动物（“多莉”）诞生20周年，标志着体细胞核移植（SCNT）进展的一个里程碑，自那时以来，已在20多个哺乳动物物种中进行了体细胞核移植，包括最近涉及人类细胞的研究，因为它显示了在终末分化细胞中诱导多能性的潜力。事实上，尽管目前存在产生多能干细胞的替代方法，但人们普遍认为，SCNT仍然是将体细胞重新编程为多能状态的最有效方法。然而，尽管近年来技术进步，SCNT的效率仍然很低。这一点最好的例证是，在妊娠期间和出生后发生的部分重编程胚胎的大量丢失。尽管缺乏详细的临床研究，但普遍的共识是，存活超过新生儿期的克隆后代是健康的，生殖能力良好；尽管在一些研究中，克隆小鼠倾向于肥胖、高胰岛素血症并且寿命较短。
SCNT克隆人中的长寿和健康老龄化一直是有争议的问题20，21，其中很大一部分原因是多莉在2003年去世前接受了一段时间的骨关节炎（OA）治疗，年龄为6岁半。然而，据我们所知，还没有对年龄相关的、，非传染性疾病，如代谢综合征、高血压和OA（老年人的三种主要共病）。这一点非常重要，因为现在已经很好地确定，在自然交配或辅助生殖过程中，对围产期环境的相对细微的改变可能会导致表观基因组的遗传性改变，这些改变与后续发育和晚发性慢性病相关。鉴于SCNT需要使用辅助生殖程序来产生供体卵母细胞，并将重组的受精卵培养至转移点，因此使用长寿和早熟的哺乳动物物种来确定在明显健康的老年克隆后代中是否存在类似的共病是很重要的。
为此，我们最近对13只7至9岁（自然寿命通常<10岁）的克隆羊进行了葡萄糖耐量、胰岛素敏感性、动态血压和刺激血压的详细评估，以及肌肉骨骼检查，包括所有主要关节的临床和放射学检查。此外，对膝关节（股骨和胫骨之间的关节）进行了磁共振成像（MRI）。这些动物起源于2005年至2007年间进行的研究，旨在通过解决与核转移点的线粒体异质性和染色质重塑相关的问题来提高SCNT的效率。先前报告了一些来源于初级胎儿成纤维细胞的克隆的妊娠结果。除了报告这些研究中的老年克隆的健康状况外，我们还报告了四个来源于产生Dolly1的乳腺细胞系的8岁Finn Dorset克隆的健康状况。也就是说，它们是Dolly的克隆（基因组拷贝）。参考了当代5岁和6岁绵羊群体的健康状况，以及绵羊特定健康相关参数的公布值。尽管这些克隆年龄较大，但发现它们血糖正常，胰岛素敏感，血压正常。尽管大多数动物都有一到两个关节的轻度骨关节炎的影像学证据，但没有一只动物跛足，也没有一只需要治疗。因此，在我们的队列中，我们没有发现SCNT克隆对老年后代健康产生有害的长期影响的证据。