作者：翟夷 北京市朝阳区六里屯社区卫生服务中心(北京城建老年病医院)

MTT检测Ru（II）聚吡啶复合物对人宫颈癌HeLa细胞系的细胞毒性，并与顺铂的结果进行比较。本研究中测试的钌配合物的细胞毒性也可以通过半抑制浓度值进行比较。通过绘制细胞活力与配合物浓度的关系，计算出配合物对应的半抑制浓度值。这些结果中，我们可以得出结论，细胞活力随着Ru（II）复合物浓度的增加而降低。配合物的半抑制浓度值均高于顺铂，说明在相同的条件下，复合物的细胞毒性活性低于顺铂。当比较半抑制浓度值时，复合物的细胞毒活性高于复合物。根据研究结果，我们推测该配合物的抗肿瘤活性可能与该配合物的特定分子形状、配体的化学结构和性质有关。
目前使用的大多数细胞毒性抗癌药物已被证明可诱导敏感细胞凋亡。不同的制剂与不同的目标相互作用，诱导细胞死亡，具有一些共同的特征（DNA的核内裂解，染色质凝结的变化），这一事实表明，细胞毒性是由细胞参与这种所谓的双程序性^细胞死亡的能力决定的。Annexin V是一种重组磷脂酰丝氨酸结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸残基特异性相互作用，可用于检测细胞凋亡为确定Annexin V阳性（凋亡）细胞的百分比，用复合物处理HeLa细胞24 h后，用流式细胞术进行检测。显示了有无复合物时HeLa细胞的代表性直方图。Annexin V阳性细胞的百分比（复杂142.02%，复杂223.09%，复杂317.2%，复杂3和38.3 %复杂4）显著增加相比，未经处理的细胞（阴性对照），但当这些细胞与阳性对照（顺铂）相比，有一个明确的相关性这些复合物与顺铂的活动.所示这些结果证实了诱导的细胞死亡主要是通过细胞凋亡发生的。
采用流式细胞术检测AO（吖啶橙）染色细胞24 h中合成的钌复合物对HeLa细胞细胞周期的影响。AO可以区分静止细胞和激活的增殖细胞，也可以允许多个G1室的差异检测。用复合物处理HeLa细胞的半抑制浓度值24 h后，细胞DNA分布。钌配合物处理后，G0/G1期细胞百分比从对照组的12.3 %分别增加到30.7、31.2、30.06和33.1 %。用钌配合物处理HeLa细胞后，G0/G1期细胞显著增强，同时S期细胞百分比相应降低。这些结果表明，复合物诱导细胞周期阻滞在G0/G1期。
分子对接研究我们进行了详细的分子对接，以进一步探索决定结合亲和力的分子因素和钌配合物与人类DNA TOP1的结合能。拓扑异构酶已经被研究为产生新的癌症治疗方法的靶点，因为当它们在细胞中被抑制时，其结果是细胞死亡。因此，拓扑异构酶的抑制剂有能力杀死所有正在经历DNA复制、读取DNA以产生蛋白质或经历DNA损伤修复的细胞。由于癌细胞分裂速度比正常细胞快得多，癌细胞会被拓扑异构酶抑制剂杀死，尽管一些具有拓扑异构酶活性的正常细胞也会被杀死。DNA TOP1在肿瘤细胞中过表达，是癌症化疗中的一个重要靶点。钌配合物被连接到TOP1的活性位点口袋中，在发现工作室中使用LibDock模块。其中，复合物的dock得分最高，为144.097千卡/mol。DNA碱基对和蛋白质氨基酸的活性位点口袋残基涉及与配合物的氢键形成。因此，这些残基在底物结合中发挥着重要的作用，从而产生对钌配合物的代谢活性。钌配合物的氢键和Dock分数。得分越高，表明受体与配体的结合亲和力越强。对接结果表明，受体-配体复合物通过氢键和疏水相互作用来稳定。
结论合成了钌聚吡啶配合物并进行了表征。DNA相互作用已通过光谱方法和粘度测量进行。综上所述，钌聚吡啶配合物通过插入方式与DNA相互作用。所有合成的配合物都与BSA相互作用较强。通过分子对接模拟了四种钌配合物与DNA TOP1的相互作用，在基于结构的药物设计中发挥了重要作用，这些结果表明合成的配合物与TOP1的核苷酸和氨基酸相互作用。在辐照条件下，钌配合物可以裂解pBR322的DNA，这表明单线态氧负责pBR322的DNA的裂解。抗菌和抗氧化活性分析表明，与其他复合物相比，复合物对所有测试微生物的活性都更高，而复合物的抗菌活性都是中等的，。合成的钌聚吡啶配合物对HeLa细胞均具有体外抗癌活性，表明复合物具有较高的细胞毒性。