作者：孟媛 北京市朝阳区六里屯社区卫生服务中心(北京城建老年病医院)

磷酸化蛋白RCM-1上PKA依赖的磷酸化位点的突变导致脉孢菌的频率时钟蛋白的wc独立转录和时钟功能受损。频率时钟蛋白磷酸化发生在大多数参与的蛋白中，磷酸化状态影响其稳定性、活性和亚细胞定位DNA复制许可因子，包括mcm2、mcm5和mcm7，均在MaPpt1-6天内表达上调。微染色体维持复合物是一种假定的DNA解旋酶复合物，可促进DNA复制的起始。MCM在真核细胞的DNA复制起始和细胞增殖中起着关键作用。OxdC存在于细胞质的周质中，并与细胞壁物质紧密结合。正如在酿酒酵母中所证明的那样，真菌中细胞壁蛋白的掺入可以完全由细胞周期中的转录时间来决定。共价连接的细胞壁蛋白基因在MaPpt1菌株中表达下调，表明MaPpt1也参与了真菌细胞壁的组织。综上所述，这些结果表明，参与分生孢子、细胞周期、细胞增殖和细胞壁组织的基因的差异表达可能促进了MaPpt1菌株微周期分生孢子的形成

MaPpt1孢子的缺失除了提高了微循环分生孢子的能力外，还促进了真菌对抗紫外线照射的能力，从而导致DNA损伤。研究人员开发了许多修复或耐受策略来对抗细胞中紫外线引起的DNA损伤，如光活化、切除修复和分生孢子色素沉着。先前的研究报道，PP5与其他蛋白质相互作用，并在DNA损伤后影响细胞周期。在哺乳动物系统和包括布鲁氏锥虫和犬弓形虫在内的一些低等真核生物中，PP5/Ppt1的丢失或减少导致对DNA损伤的反应能力下降。然而，我们的数据表明，在棘虫中，Ppt1作为DNA损伤途径的负调控因子，因为突变株比野生型和互补菌株对紫外线暴露更具抗性。这些结果表明，PP5/Ppt1参与这一途径可能保留其活性在DNA损伤反应中的结果存在分歧。从DGE数据中，我们发现在MaPpt1中有21个DNA损伤修复相关基因表达上调。在这些基因中，有4个基因参与了碱基切除修复，包括G特异性腺嘌呤糖基化酶基因、DNA-3-甲基腺嘌呤糖基化酶基因、基转移酶和Rad7。4个基因与核苷酸切除修复相关，包括ATP依赖的DNA连接酶结构域蛋白基因、交配型转换蛋白swi10和两种DNA糖基化酶基因两个错配修复基因，编码增殖细胞核抗原和复制因子-a蛋白1，也包括在内。此外，DNA修复蛋白UVS6基因是参与UVB抗性和有效的DNA损伤修复，和DNA聚合酶ε发挥重要作用在DNA损伤耐受修复，都上调。综上所述，我们的研究结果表明，MaPpt1的缺失可诱导的微循环分生孢子和分生孢子具有较高的紫外线耐受性，为开发作为害虫防治剂提供了显著的优势。MaPpt1的缺失增加了分生孢子的产量，这有利于生物防治剂的工业发酵。本研究为MaPpt1调控因子对微循环分生孢子的去磷酸化和抵消紫外线引起的DNA损伤提供了新的见解。然而，还需要进一步的工作来阐明这一过程的分子机制，其中MaPpt1的遗传操纵与微循环分生孢子相关，更多的紫外线耐受性，对这些生物防治剂的利用至关重要。